Sftpc-IRES-CreERT2：他莫昔芬诱导下，II型肺泡细胞特异性基因重组的实验策略

肺纤维化、急性肺损伤与肺癌的机制研究，绕不开一个细胞类型：II型肺泡细胞（AT2）。它承担表面活性物质的合成，在肺损伤修复中作为祖细胞分化为I型肺泡细胞，其功能异常与多种肺部疾病的进展密切相关。然而肺部细胞类型众多，支气管上皮、I/II型肺泡上皮等混杂共存，全身性基因操作很难把改变局限在AT2，组成型Cre工具又无法避开发育阶段的影响。对于聚焦特发性肺纤维化、急性呼吸窘迫综合征或肺腺癌起源机制的研究者来说，缺乏能在成年动物中将基因扰动精准锁定在II型肺泡细胞的诱导型工具，常常成为区分发育效应与成体病理的核心瓶颈。Sftpc编码表面活性蛋白C，特异性表达于II型肺泡细胞，是构建AT2特异性工具鼠的经典选择。

该品系借助CRISPR基因编辑，将IRES-CreERT2敲入Sftpc基因3'UTR，使诱导型CreERT2跟随内源Sftpc的表达谱表达，诱导后在II型肺泡细胞中发挥Cre活性。与携带loxP位点侧翼目的基因的小鼠交配后，经他莫昔芬（Tamoxifen）诱导，即可在AT2细胞中敲除floxed基因序列。需要留意的是，该品系CreERT2存在泄露情况如图1所示，选用时应结合研究目的评估，并在正式实验中考虑设置未诱导对照组。

图1. Cre mediated recombination in lung of SftpcCreERT2/+;Rosa26tdTomato/+ mouse

图2. Detection of tdTomato(red) in various tissues of SftpcCreERT2/+;Rosa26tdTomato/+ mouse.

验证数据中多组织检测显示tdTomato表达见于肺上皮细胞、睾丸间质细胞、唾液腺与肌肉，而脑、脊髓、视网膜、心、肝、棕色脂肪、胸腺、肾、胰腺、大小肠、脾与皮肤未见表达（图2，2月龄雄性）。

无论是肺纤维化中在肺泡上皮条件性调控促纤维化与抗纤维化相关基因，还是急性肺损伤后追踪AT2细胞的增殖、分化与修复功能，亦或在肺癌研究中与floxed肿瘤相关品系联用构建AT2起源的模型，该品系都提供了肺泡上皮层面的操作入口，为肺部疾病机制研究与药物评价提供了模型基础。

Sftpc-IRES-CreERT2由南模生物研发，目录号NM-KI-18020。研究者可在南模生物官网查阅品系详情，也欢迎就肺泡上皮实验设计向技术顾问咨询。

Sftpc-IRES-CreERT2 存在 Cre 泄露，我该如何设计实验对照？

该品系在未诱导状态下CreERT2 可能有低水平的核转位与基因重组（即 Cre 泄露），这在诱导型 Cre 工具中并不罕见。实验设计时，建议设置三组对照：仅携带 Sftpc-CreERT2 但未诱导的对照组、仅携带 floxed 等位但无 Cre 的对照组，以及双阳性未诱导组。通过对比这些对照与诱导实验组，可明确区分泄露效应、诱导效应与基因型本底差异。如果研究目的对泄露敏感度极高（如基因完全敲除致死或表型剧烈），建议在选型阶段咨询南模技术团队评估替代方案。

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